一、測定液體培養(yǎng)基中活的和已喪失生活能力的細菌總數(shù)
(1)顯微鏡直接計數(shù)法
采用細菌計數(shù)器或血細胞計數(shù)板在光學(xué)顯微鏡下直接觀察并進行計數(shù);
(2)涂片計數(shù)法
將已知體積(0.01mL)的待測樣品,均勻地涂布在載玻片的已知面積內(nèi)(1cm),經(jīng)固定染色后,在顯微鏡下選擇若干個視野計算細菌的數(shù)目。
(3)比濁法根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細菌的數(shù)量。
二、活菌數(shù)量的測定
(1)平板菌落計數(shù)法
平板菌落計數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當稀釋后,理論上可以認為充分稀釋后其中的微生物可以分散為單個細胞,取一定量的稀釋液與冷卻至合適溫度的培養(yǎng)基進行混合澆注平板或涂布到已凝固平板上,經(jīng)過保溫培養(yǎng)后,由每個單細胞生長繁殖形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個單細胞。統(tǒng)計菌落數(shù),根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。
(2)最大概率數(shù)(MPN)
將待測樣品在定量培養(yǎng)液中進行一系列稀釋培養(yǎng)。在一定稀釋度以前的培養(yǎng)液中出現(xiàn)細菌生長,而在這個稀釋度以后的培養(yǎng)液中不出現(xiàn)細菌生長。將最后3級有菌生長的稀釋度稱為臨界級數(shù),以 3~5次重復(fù)的3個臨界級數(shù)求得最大概率數(shù)(MPN),可以計算出樣品單位體積中細菌的近似值。
三、薄膜過濾計數(shù)法
測定水與空氣中的活菌數(shù)量時,由于含菌濃度低,則可先將待測樣品(一定體積的水或空氣)通過微孔薄膜(如硝化纖維薄膜)過濾濃縮,然后把濾膜放在適當?shù)墓腆w培養(yǎng)基上培養(yǎng),長出菌落后即可計數(shù)。