( 兔抗百日咳鮑特菌診斷血清 1mL / 瓶 )
1、檢測前準備:
0.85% 生理鹽水、蠟筆或防水筆、載玻片、一次性接種環(huán)、背景為黑色的光源、計時器
2、檢測流程(以百日咳診斷血清為例):
① 產(chǎn)品在使用前,由冰箱拿出,平衡到室溫后使用,所有操作嚴格遵守生物安全操作規(guī)范,在 BSL-2 級生物安全柜內(nèi)進行操作。
② 用酒精擦拭載玻片。用蠟筆或防水筆在載玻片上分兩個區(qū),每個區(qū)分別滴入一滴(約 40uL)生理鹽水。
③ 一次性接種環(huán)挑取適量經(jīng)純培養(yǎng)的疑似菌,在每滴生理鹽水中充分乳化,以便獲得乳白色均勻、致密菌懸液。
④ 向一區(qū)中加入一滴(約 40uL)生理鹽水,混合均勻,作為陰性對照,向另一區(qū)加入 1 滴(約 40uL)百日咳鮑特菌診斷血清,混合均勻。
⑤ 振蕩或手動晃動 2-3min,期間觀察是否有凝集現(xiàn)象,使用黑暗背景下光源透射,更容易觀察到凝集現(xiàn)象,最長觀察時間不應(yīng)超過 5min。
⑥凝集實驗后應(yīng)按照生物安全規(guī)范要求,對所有樣本、微生物培養(yǎng)物和接種產(chǎn)品都應(yīng)該視為具有感染性,實驗后進行相應(yīng)無害化處理。
3、檢驗結(jié)果的解釋:
當(dāng)抗血清與細菌接觸,會引起凝集反應(yīng),使細胞(細菌)凝集或呈簇,細胞(細菌)上清液變得清亮,細胞懸液濃度或使用的抗血清濃度不同,會產(chǎn)生不同的強度的凝集反應(yīng),見圖示,呈現(xiàn)“+”及“+”以上的凝集,均可視為陽性結(jié)果,否則記為陰性。
++++ 所有的細胞都發(fā)生凝集,細胞懸液清亮。
+++ 75%的細胞發(fā)生凝集,細胞上清略微渾濁不清。
++ 50%的細胞發(fā)生凝集,細胞上清略微渾濁不清。
+ 25%的細胞發(fā)生凝集,細胞上清略微渾濁不清。
± 少于 25%的細胞發(fā)生凝集,可見有顆粒狀的成分。
- 沒有肉眼可見的凝集,懸液仍呈現(xiàn)乳白色均勻、致密。