( 布魯氏菌 Tb 噬菌體 10*0.5 mL /盒 / 布魯氏菌 Bk2 噬菌體 10*0.5mL /盒 )
1.實(shí)驗(yàn)原理:
不同噬菌體與待檢布魯氏菌混合,在培養(yǎng)皿上發(fā)生對應(yīng)特異的布魯氏菌裂解斑,根據(jù)其特點(diǎn),分析所裂解菌株的布魯氏菌所屬種別。
2.可選試劑:
ZC-BRUCELLA-012 布魯氏菌 Tb 噬菌體(規(guī)格: 10*0.5 mL /盒);
ZC-BRUCELLA-013 布魯氏菌 Bk2 噬菌體(規(guī)格: 10*0.5mL /盒);
布魯氏菌噬菌體裂解試劑盒:內(nèi)含布氏瓊脂平板(90mm*10個(gè)),Bk2 噬菌體(0.5mL*1 瓶),半固體瓊脂(10支),Tb 噬菌體(0.5mL*1 瓶),私人定制。
3.實(shí)驗(yàn)方法:
①實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:在實(shí)驗(yàn)的平皿培養(yǎng)基進(jìn)行標(biāo)注、編號;取待檢布魯氏菌 48 h 培養(yǎng)物,用生理鹽水中研磨制成約 109/mL 菌懸液;實(shí)驗(yàn)前將噬菌體試劑從冰箱中取出。
②用法:將增殖菌比濁成 10 億菌體 /mL 或 OD 值為 1.5 的菌液濃度,取 0.1 mL 加到溶化并在 56 ℃ 水浴保溫的半固體瓊脂中,緩緩混勻,然后傾注到底層為布氏瓊脂平板上,鋪均勻。菌液半固體凝固后,用加樣器分別吸取噬菌體 8 μL ,分別滴加在菌液半固體瓊脂表面的標(biāo)注位置上,待干后,置 37 ℃ 溫箱中培養(yǎng), 24 h~48 h 觀察結(jié)果。
③結(jié)果判定:如果在培養(yǎng)皿滴加噬菌體處出現(xiàn)透明噬菌斑即為裂解,否則為不裂解。
Bk2 噬菌體:裂解所有光滑型布魯氏菌;
Tb 噬菌體:裂解光滑型牛種和豬種布魯氏菌;
Tb 噬菌體(1000 倍稀釋液):只裂解光滑型牛種布魯氏菌。
4.試驗(yàn)現(xiàn)象圖片:(暫無)