( 布病試管凝集抗原(光滑型) / 布病試管凝集抗原(粗糙型) / 布魯氏菌試管凝集抗原檢測試劑盒 )
1.實驗原理:
試管凝集法:滅活布魯氏菌抗原與待檢血清混合,如果待檢血清中存在布魯氏菌抗體,則發(fā)生肉眼可見的凝集反應。
2.設(shè)備及器材:
試管凝集抗原、被檢血清、生理鹽水、1ml 吸管及 10ml 吸管、凝集管、37℃ 保溫箱、試管架;
3.實驗方法:
3.1 被檢血清的稀釋:每份血清用 5 支試管(必要時也可以多于 5 支試管)
第一管加入 2.3mL 生理鹽水,第二管不加,第三、四、五管各加 0.5mL 。
吸取被檢血清 0.2mL ,加入第一管中,混勻?;靹蚝?,吸取第一管中血清加入第二管和第三管各 0.5mL ,將第三管混勻,并吸取 0.5mL加入第四管,混勻。從第四管吸取 0.5mL 加入第五管,混勻。再從第五管吸取 0.5mL 棄去。如此稀釋后,從第二管到第五管血清稀釋度分別為 1:12.5,1:25,1:50,1:100 。
3.2 加入抗原:先以生理鹽水將抗原原液 1:10 稀釋。
稀釋后的抗原加入各稀釋度的血清管(第一管不加,作為血清對照),每管加 0.5mL ,混勻。加入抗原后第二管至第五管,每管總量 1mL ,血清稀釋度從第二管至第五管分別為 1:25,1:50,1:100 和 1:200 ,從第一管再吸出 0.5mL ,剩 1mL 。
3.3 對照:陰性血清對照,血清稀釋后加抗原(與被檢血清對照相似);陽性血清對照,其血清稀釋到原有滴度,再加抗原(與被檢血清操作一致,一般選取 4 個稀釋度);抗原對照,適當稀釋的抗原加生理鹽水。
3.4 定比濁管制備:每次試驗須配制比濁管作為判定的依據(jù)。配制方法是:取本次試驗用的 1:10 稀釋的抗原再作對倍稀釋,即 5mL 稀釋抗原再加 5mL 生理鹽水,混合后按下表配制比濁管。
全部試驗管、對照管及比濁管充分振蕩后置 37℃ 溫箱中 20h~22h ,取出后室溫放置 1~2h ,然后以比濁管為標準判定結(jié)果。
3.5 檢驗結(jié)果的解釋
1)++++ : 完全凝集,上層液 100% 清亮。
2)+++ :幾乎完全凝集,上層液 75% 清亮。
3)++ :顯著凝集,液體 50% 清亮。
4)+ :有微量凝集,液體 25% 清亮。
5)- :無凝集,液體不清亮。
待測樣本檢測人血清 ≥ 1:100++ 為陽性;待測樣本檢測人血清 <1:100++ 為陰性。
4. 試驗現(xiàn)象圖片: