（ 彎曲菌藥敏板（瓊脂稀釋法） 10T/盒 ）
1. 檢驗(yàn)原理:
藥敏培養(yǎng)板上包被不同濃度抗生素的 MH 瓊脂( 5% 脫纖維羊血)，可檢測(cè)目前臨床及農(nóng)業(yè)、養(yǎng)殖過(guò)程中抗彎曲菌感染的 7 類 11 種抗生素，每種抗生素的 MIC 范圍：
| 所屬種類 | 抗生素 | 簡(jiǎn)寫(xiě) | MIC 范圍 |
| 大環(huán)內(nèi)酯類 | 紅霉素 | ERY | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 大環(huán)內(nèi)酯類 | 阿奇霉素 | AZI | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 喹諾酮及氟喹諾酮類 | 萘啶酸 | NAL | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 喹諾酮及氟喹諾酮類 | 環(huán)丙沙星 | CIP | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 氨基糖苷類 | 慶大霉素 | GEN | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 氨基糖苷類 | 鏈霉素 | STR | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 氯霉素類 | 氯霉素 | CHL | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 氯霉素類 | 氟苯尼考 | FLO | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 四環(huán)素類 | 四環(huán)素 | TET | （MIC: 0.5μg/ml～64μg/ml） |
| 酮內(nèi)酯類 | 泰利霉素 | TEL | （MIC: 0.25μg/ml～32μg/ml） |
| 林可酰胺類 | 克林霉素 | CLI | （MIC: 0.25μg/ml～32μg/ml） |
注意：藥敏板 1-11 列為檢測(cè)列，第 12 列為對(duì)照列。對(duì)照列中 Q1 孔為培養(yǎng)板瓊脂無(wú)菌質(zhì)控， 加入無(wú)菌稀釋液；Q2 孔為待測(cè)菌株生長(zhǎng)質(zhì)控，加入待檢菌株；Q3-Q8 孔為彎曲菌藥敏質(zhì)控孔，加入彎曲菌藥敏檢測(cè)質(zhì)控菌株 C.jejuni ATCC33560（同批藥敏培養(yǎng)板質(zhì)控菌株可只做一次）。
2. 操作方法:
①待檢菌懸液制備：用無(wú)菌棉簽或者取菌環(huán)挑取生長(zhǎng)良好的待測(cè)彎曲菌菌落 3-4個(gè)，懸浮于 3ml 無(wú)菌稀釋液中，充分混勻；
②質(zhì)控菌株菌懸液制備：用無(wú)菌棉簽或者取菌環(huán)挑取生長(zhǎng)良好的質(zhì)控菌株 C.jejuni ATCC33560 菌落 3-4 個(gè)，懸浮于 3ml 無(wú)菌稀釋液中，充分混勻；
③稀釋、調(diào)節(jié)菌液的濃度： 將待檢菌懸液與質(zhì)控菌懸液分別使用麥?zhǔn)媳葷醿x測(cè)量菌液濃度達(dá)到 0.5 麥?zhǔn)蠁挝唬?將 0.5 麥?zhǔn)蠁挝坏木鷳乙河脽o(wú)菌稀釋液進(jìn)行 10 倍稀釋（取 100μl 的 0.5 麥?zhǔn)蠁挝坏木杭拥?900μl 的生理鹽水中，充分混勻），將制備好的菌液（約 2-3μl）接種于瓊脂平板表面，每孔含菌量約為 104CFU；
④點(diǎn)樣培養(yǎng)： 將稀釋好的待檢菌液倒入無(wú)菌加樣槽，用八聯(lián)排無(wú)菌加樣器蘸取適量菌液點(diǎn)加到藥敏培養(yǎng)板 檢測(cè)列（ 1-11 列）每個(gè)孔以及質(zhì)控孔 Q2 中的瓊脂上； 用八聯(lián)排無(wú)菌加樣器蘸取適量同樣稀釋的彎曲菌質(zhì)控菌株 ATCC33560 的稀釋液加到藥敏板的對(duì)照列（第 12 列）的 Q3-Q8 孔的培養(yǎng)基上； 取 2ul-3ul 的無(wú)菌稀釋液加到對(duì)照列（第 12 列）的 Q1 孔中作為無(wú)菌培養(yǎng)基對(duì)照；蓋上平板蓋子，將藥敏板放入微需氧環(huán)境中，42℃ 培養(yǎng) 24h 或者 37℃ 培養(yǎng) 48h ，取出藥敏培養(yǎng)板，肉眼觀察藥敏板上每個(gè)培養(yǎng)孔中彎曲菌的生長(zhǎng)結(jié)果。
注意：可使用加樣器（推薦電動(dòng)連續(xù)加樣器）進(jìn)行逐個(gè)孔加樣，也可使用八道加樣排槍加樣， 每孔 2-3ul；為更容易判讀，盡量將菌液加到孔中瓊脂中央。
3. 結(jié)果判讀:
①首先觀察藥敏板對(duì)照列：加無(wú)菌生理鹽水的瓊脂質(zhì)控 Q1 孔上無(wú)任何細(xì)菌生長(zhǎng)；待檢菌株生長(zhǎng)質(zhì)控 Q2 孔上為菌苔生長(zhǎng)；質(zhì)控菌株 ATCC33560 在 Q3-Q8 孔中分別為：Q3，Q4，Q5 菌苔生長(zhǎng)，Q6，Q7，Q8 無(wú)生長(zhǎng)；
②如對(duì)照孔檢測(cè)結(jié)果正確，開(kāi)始判讀檢測(cè)孔，如不正確則檢測(cè)孔結(jié)果無(wú)效；
檢測(cè)孔結(jié)果判讀：1-11 列檢測(cè)孔，以列為單位，孔中培養(yǎng)基上完全沒(méi)有細(xì)菌的生長(zhǎng)則該孔中 抗生素的濃度判定為該藥物的 MIC 值，如果有單一菌落或者因加樣造成的薄霧狀生長(zhǎng)也判讀為陰 性生長(zhǎng)（無(wú)生長(zhǎng)）；如果在最大濃度的瓊脂孔中仍有細(xì)菌生長(zhǎng)則判讀為：MIC>64μg/ml 或者 MIC>32μg/ml（泰利霉素、克林霉素）；
在記錄單上記錄判讀結(jié)果。
4.彎曲菌藥敏板細(xì)菌生長(zhǎng)情況樣例：
