產(chǎn)品貨號(hào)：ZC-BP-005
產(chǎn)品名稱：百日咳鮑特菌增菌培養(yǎng)檢測試劑盒
包裝規(guī)格：20T/盒
主要組成成份：百日咳鮑特菌樣本采集液（2.0mL*20 支）、基礎(chǔ)增菌液（1.8mL*20 支）、添加劑 A（200μL*2支）、添加劑 B（1mL*4支）、木炭選擇性瓊脂平板（90mm*10塊/包*2包）
預(yù)期用途：百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌等病原菌多粘附于人類鼻咽部粘膜，本試劑盒主要用于百日咳鮑特菌和副百日咳鮑特菌樣本的采集、增菌、分離和培養(yǎng)
貯存條件及保質(zhì)期：百日咳鮑特菌樣本采集液 2-8℃避光保存，保質(zhì)期 12 個(gè)月；基礎(chǔ)增菌液、木炭選擇性瓊 脂平板 2~8℃避光保存，添加劑 A、添加劑 B -20℃避光保存，有效期均為 3 個(gè)月。
使用方法：
1.標(biāo)本采集及保存
1.1 標(biāo)本采集：根據(jù)采樣要求，使用鼻/咽拭子采集樣本；將采樣拭子放到百日咳鮑特菌 樣本采集液中，折斷采樣拭子桿高出部分或按斷點(diǎn)折斷拭子，擰緊蓋子，標(biāo)記樣本信息，冷 藏送至實(shí)驗(yàn)室處理。
1.2 標(biāo)本處理：將樣本采集液中的鼻/咽拭子充分?jǐn)D壓 50~80 次或者渦旋震蕩 30s，讓標(biāo) 本中的細(xì)菌均勻分布于采集液；若需對(duì)標(biāo)本先進(jìn)行 PCR 篩查，可取充分浸潤的樣本采集液 300~500μL，用于標(biāo)本 DNA 的提取，然后進(jìn)行百日咳熒光 PCR 的檢測。 1.3 標(biāo)本保存：若標(biāo)本預(yù)計(jì) 48h 內(nèi)進(jìn)行檢測，可于 2~8℃冷藏保存；若標(biāo)本計(jì)劃 1 個(gè)月 內(nèi)完成檢測，可于-20℃低溫凍存；若標(biāo)本需長期保存，可-70℃以下超低溫凍存。低溫保存 期間標(biāo)本不可凍融。
2.增菌培養(yǎng)
2.1 增菌液配制：百日咳鮑特菌增菌液須現(xiàn)用現(xiàn)配，實(shí)驗(yàn)前取所需數(shù)量的基礎(chǔ)增菌液、 添加劑 A、添加劑 B，無菌操作放入生物安全柜，溶化后將添加劑 A、B 顛倒混勻瞬時(shí)離心， 分別取添加劑 A 20μL、添加劑 B 200μL 加入到 1.8 mL 的基礎(chǔ)增菌液中混勻備用。 注：①實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作；②百日咳鮑特菌增菌液需要現(xiàn)用現(xiàn)配；③添加劑反復(fù)凍融會(huì)降低分 離培養(yǎng)效果，建議第一次使用后適當(dāng)分裝凍存。 2.2 增菌培養(yǎng)：將處理后的樣本采集液振蕩或渦旋混勻，取 200μL 加入到 2 mL 現(xiàn)配的 百日咳鮑特菌增菌液中，37±1?C 靜置培養(yǎng) 48 h～72 h。凍存標(biāo)本需解凍溶化后混勻使用。 注：期間可對(duì)增菌液進(jìn)行 PCR 檢測，確定百日咳鮑特菌的生長狀態(tài)。
2.3 平板培養(yǎng)：增菌后充分混勻培養(yǎng)液，取 50-100μL 的增菌液劃線或者直接涂抹于木 炭選擇性瓊脂平板上，37±1?C 培養(yǎng) 3～7 天，挑取疑似菌落進(jìn)行鏡檢、生化試驗(yàn)、熒光 PCR 或者質(zhì)譜等方法鑒定。 注：增菌后培養(yǎng)液不渾濁或略微渾濁，若培養(yǎng)液有明顯的渾濁現(xiàn)象，疑似染菌，建議重新增菌培養(yǎng)。
檢驗(yàn)結(jié)果的解釋: 銀灰色菌落：疑似百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌。
檢驗(yàn)方法的局限性：本試劑盒僅用于百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌樣本的采集、增菌、分離和培養(yǎng)，菌株 的鑒定需結(jié)合菌落形態(tài)、鏡檢、生化試驗(yàn)、熒光 PCR 或者質(zhì)譜等方法綜合判定。部分廠家 VTM 運(yùn)送培養(yǎng)基等病毒型采集液采集的樣本在增菌培養(yǎng)時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)白色沉淀，影響結(jié)果， 不建議與本試劑增菌液配合使用。